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          人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒操作步驟
          更新時間:2011-03-16 點擊次數(shù):2494

                           人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒操作步驟

          1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

          480pg/ml
          5號標(biāo)準(zhǔn)品
          150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          240pg/ml
          4號標(biāo)準(zhǔn)品
          150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          120pg/ml
          3號標(biāo)準(zhǔn)品
          150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          60pg/ml
          2號標(biāo)準(zhǔn)品
          150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
          30pg/ml
          1號標(biāo)準(zhǔn)品
          150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

                                                           
           
          2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
          3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
          4.         配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
          5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
          6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
          7.         溫育:操作同3。
          8.         洗滌:操作同5。
          9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
          10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
          11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
          1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
          2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
          上海恒遠生物長期專業(yè)代理美國進口分裝、原裝ELISA“人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒”,現(xiàn)貨供應(yīng),*,質(zhì)量保證。中英文雙版說明書,提供實驗代測服務(wù)。需要產(chǎn)品以及其它詳細信息請直接與我們,一個工作日之內(nèi)給予答復(fù)。

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